? ? ? ? HPLC一般指高效液相色譜，是一種多功能的分析方法，可對(duì)各種化合物進(jìn)行分離和定量。它廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用、藥物分析、食品分析、環(huán)境監(jiān)測(cè)、精細(xì)化工產(chǎn)品分析等眾多領(lǐng)域。HPLC的技術(shù)都具有基本原理，比如樣品引入，色譜柱中樣品組分的分離以及最后使用多種檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)。想了解制備型HPLC要先對(duì)分析型HPLC進(jìn)行初步研究，兩種技術(shù)之間的基本區(qū)別是操作規(guī)模，下面將重點(diǎn)介紹區(qū)別：
? ? ? ? 明確分析的目標(biāo)
? ? ? ? 在進(jìn)行分析之前，你應(yīng)該對(duì)分析目標(biāo)有清楚的了解。你是希望獲得有關(guān)樣品成分純度的信息然后進(jìn)行定性，還是希望能快速分離、純化產(chǎn)品。在第一種情況下，你可以使用分析型HPLC分離。在第二種種情況下，你可以使用制備型HPLC。
? ? ? ? 規(guī)模
? ? ? ? 在分析型中，樣品通量很小，通常為微升水平，而在制備型中，進(jìn)樣量很大，是分析型的幾百倍上千倍，從而可以產(chǎn)生毫克至克級(jí)的純化合物。為了達(dá)到這個(gè)效果，制備型選用的是大流速的泵，粗粒徑填料，粗管徑的色譜柱，以提高色譜柱的載樣量。
? ? ? ? 尺寸
? ? ? ? 與分析HPLC柱相比，制備型HPLC柱比較大。分析色譜柱通常直徑為4.6mm。恒譜生分析HPLC色譜柱基于高純硅膠，采用獨(dú)特鍵合技術(shù)，具有優(yōu)異的峰形，更好的選擇、靈敏性和重要性。基質(zhì)金屬含量低，對(duì)所有類型的分析物均表現(xiàn)良好峰形。機(jī)械強(qiáng)度穩(wěn)定性好，質(zhì)控嚴(yán)格，確保優(yōu)異的色譜柱性能和延長(zhǎng)色譜柱壽命。優(yōu)勢(shì)在于：平衡時(shí)間短；高流速，低背壓；使用壽命長(zhǎng)；縮短分析時(shí)間，節(jié)約溶劑；高柱效，分離度佳。
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? ? ? ? 而制備色譜柱的內(nèi)徑通常在50-200mm的范圍內(nèi)。恒譜生C8、C18、C4制備液相色譜柱由柱管、壓帽、卡套（密封環(huán)）、篩板（濾片）、接頭、螺絲等組成。柱管用316L不銹鋼制成，不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過拋光，提高柱效，減小管壁效應(yīng)。廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、環(huán)境和食品等多個(gè)領(lǐng)域，滿足從實(shí)驗(yàn)室分析到工業(yè)大規(guī)模制備的不同需求。
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? ? ? ? 與制備色譜柱相比，分析色譜柱填充的固定相粒徑范圍在3-5μm之間，而制備色譜柱填充的是大于10μm的較大顆粒。這樣的粒徑允許更高的塔流速，較長(zhǎng)的長(zhǎng)度和較寬的色譜柱直徑可提供較低的背壓。
? ? ? ? 進(jìn)樣方式
? ? ? ? 運(yùn)用分析色譜分析時(shí)通常涉及多種的樣品進(jìn)樣量，因此自動(dòng)進(jìn)樣器是首選的進(jìn)樣方式。相反，在制備分離中，樣品數(shù)量很少，甚至可能只有一個(gè)樣品只是進(jìn)樣量較大，因此可以使用大體積進(jìn)樣環(huán)。
? ? ? ? ?探測(cè)器選擇
? ? ? ? ?由于分析要求，通常只將非破壞性檢測(cè)器（例如UV，熒光或折射率檢測(cè)器）用于制備級(jí)應(yīng)用。與分析色譜分離相比制備色譜樣品進(jìn)樣量大，因此檢測(cè)器具有更大的流通池。
發(fā)布于: 2021-02-05