??????? 明明實(shí)驗(yàn)時(shí)只分析一種物質(zhì)，為什么峰圖會(huì)出現(xiàn)雙峰呢？通常情況下，正確的峰型應(yīng)該是尖銳而對稱的，出現(xiàn)雙峰應(yīng)該是實(shí)驗(yàn)過程中有錯(cuò)誤的步驟導(dǎo)致的。液相色譜出現(xiàn)“雙峰”的原因有很多。一般有以下幾種原因：色譜柱、溶劑、進(jìn)樣量、樣品特性和pH值。恒譜生簡單介紹其中色譜柱、溶劑因素導(dǎo)致出現(xiàn)雙峰及解決辦法。
??????? 色譜柱
??????? 如何判斷是色譜柱出現(xiàn)問題導(dǎo)致雙峰出現(xiàn)呢？操作人員分析單一純物時(shí)，如果每個(gè)色譜峰都出現(xiàn)雙峰，可以確定是色譜柱頭受損或者是柱頭污染了。如果是色譜柱正常，進(jìn)樣量少并且色譜峰形為一大峰帶一小峰，不一定拖尾，這種情況可能是柱頭受堵?？梢詫⑸V柱反過來接，用流動(dòng)相或其它溶劑沖洗掉堵在柱頭的殘留物，然后再反過來，一般都能解決。如果反復(fù)還是不能解決問題，可能是柱頭塌陷的問題。恒譜生液相色譜柱壽命在正確使用時(shí)可達(dá)2年以上，但是柱子使用一段時(shí)間后，可能有一些吸附作用強(qiáng)的物質(zhì)保留于柱頂造成柱頭塌陷，這時(shí)可補(bǔ)加填料使柱效恢復(fù)。每次使用完色譜柱后，需用洗脫能力強(qiáng)的洗脫液沖洗，以延長色譜分析柱的壽命。
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??????? 色譜柱頭塌陷的原因有很多，比較常見的是色譜泵壓力過高，填料壓碎產(chǎn)生空隙。除此之外還有諸如裝填時(shí)壓力過低，不密實(shí)；流動(dòng)相溶解填料，造成空隙；色譜柱入口篩板堵塞等原因。恒譜生色譜篩板能有效地?cái)r截樣品、流動(dòng)相或管線及密封件的顆粒物對色譜柱的污染，保護(hù)色譜柱和儀器。篩板使用一段時(shí)間后，攔截的污染物會(huì)堵塞篩板，因此需要定期更換。但是相較于損壞色譜柱，更換一個(gè)篩板顯得性價(jià)比更高，成本更低廉。
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??????? 溶劑問題
??????? 反相色譜流動(dòng)相多為甲醇、乙腈、水，實(shí)驗(yàn)中往往會(huì)從中加各種添加劑以改善分離性能。有時(shí)候?yàn)榱藰悠返娜芙庑曰蚍€(wěn)定性加入了一點(diǎn)的緩沖液，但是緩沖液的酸堿性可能會(huì)導(dǎo)致樣品轉(zhuǎn)化，從而產(chǎn)生雙峰現(xiàn)象?？梢愿鼡Q緩沖液或者更換流動(dòng)相試一試。
??????? 影響雙峰出現(xiàn)的原因還有很多，比如樣品超過柱載量，從而導(dǎo)致二次分配；儀器間隔記錄時(shí)間太短都有可能造成雙峰出現(xiàn)。因此具體情況要具體分析，以上僅供各位色譜工作者參考。想知道更多色譜相關(guān)咨詢，可關(guān)注恒譜生！
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發(fā)布于: 2021-09-24